Микоплазма пневмония мазок из зева

[09-071]
Mycoplasma pneumoniae, ДНК [реал-тайм ПЦР]

445 руб.

Это молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить в исследуемом биоматериале ДНК возбудителя атипичной пневмонии – Mycoplasma pneumoniae.

Синонимы русские

Возбудитель микоплазмоза, микоплазма.

Синонимы английские

M. pneumoniae, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Бронхоальвеолярный лаваж, биоптат, венозную кровь, мазок из носоглотки, мокроту, мазок из зева (ротоглотки), плевральную жидкость.

Общая информация об исследовании

Mycoplasma pneumonia – причина респираторного микоплазмоза и главный возбудитель атипичной пневмонии (ею вызвано 30 % всех пневмоний). В некоторых случаях она может приводить к развитию менингита, энцефалита, панкреатита и к потере слуха. Инфекция чаще протекает бессимптомно, возбудитель способен длительно персистировать в организме.

Основной путь передачи – воздушно-капельный. Источником инфекции является больной микоплазмозом или бессимптомный носитель M. pneumoniae. Инкубационный период составляет 2-3 недели. В клинической картине заболевания преобладает лихорадка, общее недомогание, головная боль, а также кашель, который усиливается в течение 1-2 дней и может стать мучительным. В 5-10 % случаев развивается трахеобронхит или пневмония, для которых характерен мучительный кашель с трудноотделяемой мокротой, иногда – с прожилками крови. Иногда инфекция осложняется синдромом Стивенса – Джонсона и другими кожными заболеваниями, асептическим менингитом и менингоэнцефалитом, поперечным миелитом, синдромом Гийена – Барре, полинейропатией, феноменом Рейно, апластической анемией, нарушениями сердечного ритма и проводимости, застойной сердечной недостаточностью, болями в грудной клетке и в суставах.

Наиболее быстрым и чувствительным методом выявления M. pneumoniae является полимеразная цепная реакция. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Для чего используется исследование?

Для установления причины воспалительных заболеваний нижних дыхательных путей.
Для диагностики атипичной пневмонии.
Для оценки эффективности проводимой антибактериальной терапии.

Когда назначается исследование?

При воспалительных заболеваниях нижних дыхательных путей, в том числе при подозрении на атипичную пневмонию.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

микоплазменная инфекция, вызванная M. pneumoniae.

Причины отрицательного результата:

отсутствие микоплазменной инфекции, вызванной M. pneumoniae.

Поскольку M. pneumoniae способна к персистенции, то выделение ее ДНК в исследуемом биоматериале не может на 100 % свидетельствовать об острой микоплазменной инфекции. Если ДНК M. pneumoniae в исследуемом биоматериале не выявляется, то наличие инфекции, вызванной M. pneumoniae, маловероятно.

Также рекомендуется

Mycoplasma pneumoniae, IgM
Mycoplasma pneumoniae, IgA
Mycoplasma pneumoniae, IgG

Кто назначает исследование?

Терапевт, педиатр, врач общей практики, пульмонолог.

Литература

Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д.Ющука, Ю. Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 1056 с.
Baum S. G. Mycoplasma pneumoniae and atypical pneumonia. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J. E., Dolin R (Eds); 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.

Источник

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток ротоглотки

Определение ДНК Mycoplasma pneumoniae в соскобе эпителиальных клеток из ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Микоплазмы играют значительную роль в возникновении ряда заболеваний человека. В настоящее время известны около 40 видов семейства Mycoplasmataceae. Человек является естественным хозяином, по крайней мере, 15 видов микоплазм. Среди них ведущую роль в развитии заболеваний органов дыхания играет M. pneumoniae. Однако микоплазма пневмония способна поражать не только дыхательную систему. Описаны неврологические, дерматологические, желудочно-кишечные нарушения, напрямую или косвенно вызванные инфицированием этим микроорганизмом. M. pneumoniae является высоковирулентным возбудителем, поражающим в первую очередь дыхательную систему. Заражение происходит воздушно-капельным путем, источником является инфицированный человек. Как при естественном, так и при экспериментальном заражении после инкубационного периода продолжительностью от 3 до 11 дней заболевают 40-90% пациентов. Невосприимчивые к микоплазме пациенты выделяют возбудитель и могут служить источником инфекции в течение нескольких недель. У них закономерно формируется рост титра антител без клинических симптомов заболевания. Формирующийся к микоплазме пневмония иммунитет нестоек. Наиболее часто M. pneumoniae поражает верхние и нижние дыхательные пути. Респираторный микоплазмоз очень распространен в популяции людей и обычно составляет 10-16% всех случаев острых респираторных заболеваний (ОРЗ). В период эпидемических вспышек доля M. pneumoniae в этиологической структуре острых инфекций органов дыхания может составлять 30-40%. Отмечено, что респираторный микоплазмоз характеризуется определенными возрастными особенностями. Наибольшая заболеваемость микоплазменными инфекциями отмечается у детей школьного возраста.

Нередко (особенно у детей школьного возраста и молодых людей) инфекционный процесс в верхних дыхательных путях распространяется на терминальные отделы респираторного тракта, приводя к развитию пневмонии. Частота легочных микоплазмозов может значительно варьировать в зависимости от эпидемиологической ситуации: во время подъемов заболеваемости частота микоплазменных пневмоний достигает 35%, а в периоды эпидемиологического благополучия составляет лишь 2-6% от общего числа пневмоний. У детей и подростков 5-17 лет микоплазменная пневмония может составлять до 45% всех пневмоний. Долгое время из-за сложности культивирования диагностика микоплазменной инфекции была возможна только в условиях специализированных лабораторий. Разработка и оптимизация новых высокочувствительных методов, таких как ПЦР и иммуноферментный анализ, способствовали прогрессу в изучении данной проблемы.

Аналитические показатели:

определяемый фрагмент — специфичный участок ДНК Mycoplasma pneumoniae;

специфичность определения — 100%;

чувствительность определения – 100 копий в пробе .

Литература

Ноников В.Е., Воробьева М.Г. Микоплазменные инфекции. Consilium Medicum. 2006;8(10):38-41.
Самсыгина Г.А. Микоплазмоз респираторного тракта у детей и подростков. Педиатрия. — М. 2009;3:78-81.
Таточенко В.К. Пневмония у детей: диагностика и лечение. Лечащий врач. — М. 2008;8:5-9.
Хулуп Г.Я., Василевский И.В., Качан Г.Л., Костюк С.А., Силич Т.В. Роль микоплазменной инфекции в возникновении и течении заболеваний органов дыхания у детей и подростков. Медицина. — М. 2007;4:43-47.
Sánchez-Vargas F.M., Gómez-Duarte O.G. Mycoplasma pneumoniae-an emerging extra-pulmonary pathogen. Clinical Microbiology and Infection. 2008;14(2):105-117.

Взятие материала желательно проводить до диагностических и лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя.

Взятие биологического материала рекомендуется проводить до начала применения лекарственных препаратов (антибактериальных, противовирусных, противопаразитарных). При проведении исследований в целях контроля лечения целесообразно проводить взятие проб на ПЦР-тесты не ранее, чем через 10-14 дней после окончания применения соответствующих препаратов локального действия и не ранее, чем через один месяц после проведения системной терапии.

При подготовке пациента к процедуре следует учесть:

за 6 часов до исследования не рекомендуется использовать лекарственные средства для орошения ротоглотки и препараты для рассасывания;
перед проведением исследования не чистить зубы, не использовать жевательную резинку/пастилки для освежения дыхания;
перед началом исследования прополоскать полость рта водой комнатной температуры.

Желательно соблюдать все описанные условия, если лечащим врачом не рекомендовано иное.

стойкий длительный кашель на фоне субфебрильной температуры;
пневмонии, не поддающиеся стандартной антибиотикотерапии;
сочетание клинических признаков поражения дыхательной системы, кожи и слизистых;
общение с больными трахеитами, бронхитами в анамнезе (1 — 1,5 нед.);
длительный субфебрилитет неясной этиологии.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Тест качественный.

Результат выдаётся в терминах: «обнаружено» или «не обнаружено».

«Обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для Mycoplasma pneumoniae, инфицирование Mycoplasma pneumoniaе.

«Не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Mycoplasma pneumoniae, или концентрация ДНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Источник

Информация об исследовании

Микоплазмы – это группа одноклеточных микроорганизмов, занимающих промежуточное положение между вирусами и бактериями. Микоплазмы обитают в почве на растениях и даже в гейзерах, но размножаются они лишь внутри клеток организма человека или животного (клетке хозяина). Размножение микоплазм происходит интенсивно за короткий промежуток времени. Малые размеры микоплазм не позволяют им синтезировать все необходимые вещества для своего существования, поэтому для роста и развития они используют ресурсы клетки хозяина (внутриклеточный паразитизм). Обычно микоплазмы заселяют слизистые оболчки животных и человека. Заражения микоплазмами способно вызывать воспаление дыхательных и мочеполовых путей, а также суставов. Заболевания вызванные микоплазмами входят в группу — микоплазмозов.

Одним из наиболее распространенных представителей семейства микоплазм является: Micoplasma pneumonia — возбудитель атипичной пневмонии и микоплазменного бронхита (легочной микоплазмоз у взрослых и детей).
Эпидемиология. Путь передачи — воздушно-капельный.
Источник инфекции — больной человек и здоровый (бациллоноситель). Обычно наблюдается сезонность — осеннее-зимний период, но сохраняется возможность заражения в течение всего года. Наиболее высока заболеваемость в организованных коллективах и семьях. Формирующийся иммунитет непродолжителен.

Клинические проявления:
Инкубационный период: до 3-х недель.

Кашель от сухого надрывного со светлой мокротой.
Кашель — самый частый симтом при поражении респираторного тракта. У больных с микоплазменной инфекцией присутствует всегда, но среди кашляющих всего 3-10% больных пневмонией.
Одышка довольно редкий симптом микоплазменной инфекции, если возникает, то выражена слабо.
Лихорадка — не достигает высокой степени выраженности.
Симптомы фарингита у 6-59%.
Ринорея у 2-35%.
Боли в ухе (мирингит) у 5%.
Бессимптомный синусит.
При физикальном обследовании выявлются невыраженные хрипы (сухие или влажные мелкопузырчатые), перкуторно чаще изменений нет.

Одним из современных методов объективного обследования микоплазменной инфекции является ПЦР-диагностика.
ПЦР (полимеразно-цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его. Метод ПЦР основан на принципе репликации ДНК. Чувствительность метода — 93%, специфичность — 98%.

Хламидия пневмонии (Chlamidia pnеumoniae) — это патогенные облигатные внутриклеточные грамотрицательные микроорганизмы, которые по своим свойствам определяются как нечто среднее между бактериями и вирусами, паразитирующие на слизистых оболочкках человека и животных. Они также как и бактерии в своём составе содержат ДНК и РНК, а также имеют клеточную стенку, рибосомы, но также как и вирусы могут размножаться лишь находясь внутри клеток хозяина, т.к.для размножения использует ресурсы данной клетки (внутриклеточный паразитизм).
Эпидемиология.
Заболевания вызываемые Chlamidia pneumonia – антропонозные инфекционные болезни с поражением органов дыхания. Источник инфекции больные и здоровые (бациллоносители). Путь передачи воздушно- капельный. Возбудитель выделяется во внешнюю среду с отделяемым из носоглотки при кашле, чихании, разговоре.
Клинические проявления: обычно хламидийная (инфекция) пневмония начинается с респираторного синдрома, проявляющегося трахеобронхитом, назофарингитом, субфебрильной температурой тела, малопродуктивным, мучительным кашлем, скудными аускультативными данными. Характеризуется внелегочными проявлениями: кожными, суставными, гематологическими, гастрэнрологическими, неврологическими и другими. А также нетипичными лабораторными показателями — отсутствие лейкоцитоза и нейтрофильного сдвига в перифирической крови, умеренное повышение СОЭ.
Для хламидийной и микоплазменной пневмонии характерно затяжное рецидивирующее течение. Одним из методов современной диагностики хламидийной инфекции является-ПЦР.

Источник

Mycoplasma pneumoniae (микоплазма пневмония) относится к классу Mollicutes, порядку Mycoplasmatales, семейству Mycoplasmataceae и роду Mycoplasma, является мембрано-ассоциированным микроорганизмом, способным к саморепликации и длительной персистенции в восприимчивом организме. Chlamydophila pneumoniae, согласно последней классификации, относится к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydophila, является облигатным внутриклеточным паразитом слизистой оболочки человека и животных. Цикл развития Chlamydophila pneumoniae состоит из чередования функционально и морфологически различных форм – элементарных и ретикулярных телец. Элементарные тельца метаболически малоактивны, но обладают инфекционными свойствами и способны проникать в чувствительную клетку. Ретикулярные тельца метаболически активны, обеспечивают репродукцию микроорганизма и не обладают инфекционными свойствами. M.pneumoniae и C.pneumoniae, по мнению ряда исследователей, могут длительно персистировать в клетках эпителия и лимфоглоточном кольце. Источником респираторных инфекций, вызванных M.pneumoniae и C.pneumoniae, могут быть больные и носители данных микроорганизмов в респираторном тракте. Периодически каждые 3–5 лет наблюдаются эпидемические подъемы заболеваемости, которые длятся несколько месяцев. ОРЗ, вызванные M.pneumoniae и C. pneumoniae, встречаются чаще у школьников, студентов и военнослужащих, а также у лиц с иммунодефицитом. Часто описываются семейные вспышки. Инкубационный период длится 1–4 недели. Микоплазменные пневмонии по данным ВОЗ составляют 10–20% от общего числа пневмоний. Заболевания, вызванные данными возбудителями, не поддаются лечению антибактериальными препаратами широкого спектра действия. Летальность при микоплазменной пневмонии составляет 1,4%. Данные культуральных исследований свидетельствуют о случаях носительства C.pneumoniae в лейкоцитах периферической крови (до 25% у взрослых), повышенный уровень АТ к C.pneumonia обнаруживается у 47,7% доноров крови. Носительство C.pneumoniae в эпителии верхних дыхательных путей составляет 1–2% у взрослых и 4–6% у детей без симптомов ОРЗ.

Показания к обследованию. Остро возникшее заболевание с локальными симптомами поражения верхних или нижних дыхательных путей: фарингит, гриппоподобные заболевания, синусит, бронхит, пневмония.

Дифференциальная диагностика. ОРЗ вирусной природы, коклюшная инфекция.

Материал для исследований

Мазки из носоглотки – обнаружение АГ;
мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов (поражение верхних дыхательных путей);
мокрота, плевральная жидкость, аспираты из зева и трахеи, БАЛ – выявление ДНК микроорганизмов (поражение нижних дыхательных путей);
сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика заболеваний включает культуральное исследование, обнаружение ДНК M.pneumoniae и C.pneumoniae, обнаружение АГ C.pneumoniae, обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральное исследование обладает низкой чувствительностью (40–60%) и длительностью (10–28 дней), в связи с чем для рутинной диагностики практически не используется.

Наиболее специфичным методом прямой диагностики названных патогенов является выявление их ДНК методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации который позволяет избежать перекрестных реакций с непатогенными для человека микоплазмами (M.salivarium, M.orale, M.buccae), в норме колонизирующими ротовую полость человека.

Для обнаружения АГ C.pneumoniae применяют методы МФА (РИФ), ИФА. Диагностическая ценность этих исследований невелика.

Для обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae применяют ИФА (качественные, полуколичественные и количественные тесты), РСК, МИФ. Наиболее чувствительным является выявление АТ при применении МИФ, позволяющее идентифицировать специфические иммуноглобулины G, А и М. С целью исключения ложноположительных результатов обнаружения IgM, этот показатель определяют после обнаружения повышенного уровня IgG. При таких исследованиях наибольшую специфичность имеют количественные тесты с одновременным исследованием двух образцов крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки). Метод РСК, использовавшийся ранее для диагностики инфекций, вызванных C.pneumoniae, выявлял АТ к роду Chlamydophila с чувствительностью не более 30% и не позволял дифференцировать C.trachomatis, C.psittaci и C.рneumoniae.

Показания к применению различных лабораторных исследований. С целью быстрой этиологической диагностики используется выявление ДНК микроорганизмов методом ПЦР. Выявление АТ применяют для ретроспективной диагностики и ретроспективного анализа природы эпидемических вспышек.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для диагностики заболеваний нижних дыхательных путей (бронхиты, пневмонии) мазки из носоглотки и ротоглотки использовать не рекомендуется в связи с низкой информативностью исследования данного материала. При определении титра АТ в образцах крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки), диагностически значимым считается его нарастание не менее чем в 4 раза во второй сыворотке. При диагностике заболеваний, вызванных M.pneumoniae, следует учитывать, что концентрация специфических АТ к патогену при ОРЗ становится максимальной через 3–4 недели от начала болезни, затем она быстро падает ниже диагностически значимого уровня; у 30% пациентов с пневмонией, вызванной названным микроорганизмом, уровень специфических АТ не поднимается выше диагностически значимого, т. е. отрицательный результат исследования не исключает наличия инфекции. Возможно ложноположительные результаты определения АТ- IgM к C.pneumoniae в случаях присутствия ревматоидного фактора, особенно у пожилых пациентов. В связи с недостаточной чувствительностью тестов для выявления АГ методом РИФ получение отрицательных результатов при их использовании не исключает возможного инфицирования.

Источник