Посев на чувствительность к антибиотикам пневмония

Анализ на чувствительность к антибиотикам широко применяется в педиатрии и в терапевтической практике. Он показан для назначения адекватного лечения при инфекционных процессах. Патогенные бактерии чувствительны не ко всем типам антибактериальных препаратов, поэтому так важно выбрать подходящий, угнетающий жизнеспособность микрофлоры антибиотик. Быстрое подавление активности патогенной микрофлоры снижает риск хронизации болезни и развития вторичных осложнений.

Общие сведения об анализе

Анализ на чувствительность к антибиотикам – лабораторный тест, который определяет тип возбудителя, общий объем патогенных сред. Перед тем, как сдавать анализ, требуется подготовиться. Обычно исследование назначают на утро. Пациентам не рекомендуется подмываться, промывать носовые ходы, умываться. Нельзя принимать антибиотики из-за риска получения ложных результатов. О том, как сдавать анализ правильно, расскажет лечащий врач.

Анализ на чувствительность к антибиотикам показан для изучения типа бактерий, определения медикаментозной терапии.

Основная цель заключается в определении типа бактерии, ее устойчивости или чувствительности к различным группам антибиотиков.

Показания и исследуемые пробы

Основными показаниями к назначению анализа являются острые воспалительные процессы бактериальной природы и составление плана дальнейшего ведения пациента. Анализ применяется в хирургии, урологии, нефрологии, онкологии других отраслях медицины.

Исследуемый биологический материал зависит от текущего клинического анамнеза пациента, локализации воспалительного очага. При обширном сепсисе рекомендуется развернутое изучение всех биологических материалов. Для исследования подходят:

Кровь. Биохимический развернутый гемотест помогает определить не только тип возбудителя, но и общее состояние организма в целом.
Урина. Бакпосев мочи проводится для уточнения половых инфекций, воспаления почек, органов урогенитальных путей.
Анализ кала. Применяется в отношении пациентов с воспалением кишечного тракта, осложнениями острых кишечных инфекций, подозрением на паразитарные инфекции. Одновременно изучают физические и химические параметры каловых масс.
Мазок из цервикального канала у женщин. Метод исследования помогает определить инфекции половых путей.
Исследование спермы, мазок из уретры, секрет простаты. Анализы на бактериальный посев применяются для уточнения инфекций различной локализации у мужчин.
Анализ мокроты. Помогает в диагностике дыхательных заболеваний, туберкулеза легких, пневмонии. Одновременно оценивают количество примесей — гноя, крови, слизи.

При хронических патологиях респираторного тракта и дыхательной системы возможно проведение забора мазка из носовых ходов, гортани. Анализ широко распространен в педиатрии ввиду легкости забора биологического материала.

Методы изучения материалов

Бакпосев выполняется несколькими способами, среди которых диско-диффузионный метод, Е-тест, метод разведения. В каждом случае выполняется определенный тип теста.

Дисковый способ

Распространенный и простой способ определения типа бактериальной микрофлоры. Исследуемый материал размещают в чаше Петри по всей поверхности, помещают небольшие картонные диски, смоченные в определенном виде антибиотика. После чашу плотно закрывают и устанавливают в термостат при температуре человеческого тела на 12 часов.

Бакпосев мочи назначается при подозрении на инфекции мочеполовых путей и урогенитального тракта

Под воздействием диффузных процессов антибактериального препарата формируется зона подавления патогенной микрофлоры. По окончанию анализа производят замер диаметра выявленной зоны подавления.

E-тест

Способ бакпосева похож на диско-диффузный, однако, вместо картонных дисков в чашу помещают специальную шкалу-полоску с различной интенсивностью пропитки антибиотиком. Посев инкубируют около 12 часов, после чего оценивают эффективность каждой пропитанной зоны полоски. Выбор антибиотика по результату теста зависит от выраженности зоны подавления на определенном участке полоски. Е-тест простой и доступный метод тестирования, но отличается высокой стоимостью.

Методы разведения

Анализ основан на последовательном двойном разведении антибиотика от максимальной к минимальной концентрации. 1 мл биоматериала разбавляют 10 раз в 10 пробирках с питательной средой. В той пробирке, где прекращается рост патогенной микрофлоры, обозначают максимальной границей количества патогенов в пробе. Этот же метод применяется для выявления чувствительности к антибиотикам.

Минимальная бактерицидная концентрация (МБК)

Минимальная бактерицидная концентрация — наименьшая концентрация антибактериального вещества, которая уничтожает патогенные бактерии на 100%. Показатель МБК учитывают и в лечении тех пациентов, у которых отсутствует эффективность от ранее назначенной этиотропной терапии. Анализ на флору и МБК особенно применяют на фоне остеомиелита, генерализованного сепсиса или воспаления, бактериального миокардита, эндокардита.

Современные лаборатории оснащены необходимым оборудованием для определения типа и чувствительности бактерий. Получение результатов занимает 1-2 суток, что зависит от транспорта полученного материала и вида исследования.

Расшифровка результатов

Для определения чувствительности антибиотика оценивают зоны подавления роста колоний патогенных штаммов. Категории резистентности непостоянны, поэтому регулярно пересматриваются из-за изменения чувствительности к антибактериальным препаратам.

Анализ на флору постоянно применяется в различных медицинских сферах

Мутация патогенов вызвана и беспорядочным применением антибиотика без дополнительных исследований. Клиницисты выделяют несколько видов интерпретаций:

клинический;
микробиологический.

Оценка клинического метода основана на эффективности действия того или иного препарата. Микробиологическая интерпретация основана на распределении концентрации антибиотика и степени подавления патогенной активности в каждой концентрации. Благодаря микробиологической интерпретации подбирается доза препарата для достижения высоких терапевтических результатов.

Расшифровка по типу возбудителя

Проведение анализа на чувствительность к антибиотикам необходимо и при неясной природе воспалительного процесса. Учитывая, что после приема антибактериальных препаратов, патогенные штаммы могут мутировать, изменять состояние, то микроорганизмы классифицируют на устойчивые, чувствительные, условно-чувствительные.

Устойчивые

Устойчивые или резистентные бактерии характеризуются дальнейшим ростом и патогенной активностью даже на фоне приема максимальных доз препарата. В этом случае требуется длительное лечение, назначение комбинированных антибиотиков с различными концентрациями.

Условно-чувствительные

Условно-чувствительные или промежуточно-резистентные бактерии провоцируют различный терапевтический исход. Лечебный эффект достигается, благодаря повышению суточной дозы препарата, постоянной коррекции концентрации антибиотика.

В отдельных случаях резистентные и промежуточно-чувствительные бактерии объединяются в одну группу устойчивых штаммов. Лечение в таком случае носит эмпирический характер. Назначение минимальные дозы с их постепенным повышением. К таким возбудителям относятся хламидии, уреаплазма, микоплазма.

Чувствительные

Чувствительность бактерий к антибиотику характеризуется быстрым подавлением патогенной активности под воздействием минимальных или стандартных возрастных доз препарата. Для выздоровления достаточно одного медикаментозного курса.

Исходя из этой классификации, назначение антибиотиков не оправдано только на основании предъявляемых жалоб и клинической картины. Именно поэтому показано проведение бакпосева.

Полученные результаты исследования на бакпосев имеют клиническую значимость только на момент острого периода воспалительного процесса. Таким образом, при рецидиве инфекции через определенное время картина может значительно измениться, а назначенный ранее антибиотик станет неэффективным. При каждом обострении хронической инфекции показано проведение нового анализа.

Читайте далее: анализ крови на МНО

Источник

Пневмония – это достаточно опасное в прогностическом плане заболевание дыхательной системы, которое проявляется воспалением нижних отделов респираторного тракта и паренхимы легких. Его диагностика базируется на оценке жалоб и объективного статуса больного, физикальных данных. Из дополнительных (инструментальных и лабораторных) методов обследования золотым стандартом диагностики является проведения обзорной рентгенограммы, которая в большинстве случаев подтверждает либо же опровергает предварительный диагноз, а помимо этого, показывает локализацию воспалительного процесса. Все остальные анализы (общий анализ крови, мочи, посев мокроты), по своей сути, имеют ретроспективное значение, хотя некоторые необходимы для проведения дифференциальной диагностики, а также исключения фоновых (сопутствующих) заболеваний. Теперь касательно анализа мокроты. Мокрота – это патологический секрет, который выделяется (отходит) в результате воспалительного процесса в респираторном тракте, который затрагивает слизистую оболочку дыхательных путей. Кроме того, нарушается функционирование клеток реснитчатого эпителия, которые ответственны за выведение этого секрета, что, в свою очередь, вызывает кашлевой рефлекс, сопровождающийся выделением мокроты. При пневмонии исследование мокроты надо проводить обязательно, несмотря на то, что это исследование не является золотым стандартом диагностики. Мокроты отходит меньше, чем при бронхоэктатической болезни, но собрать ее не проблема.

В результате микроскопического исследования определяется (в самую первую очередь) характер окраски (цвет) клеточной стенки микроорганизмов по Грамму – уточняется их принадлежность к грамположительным или же к грамотрицательным микроорганизмам.

Анализ мокроты Это обследование занимает не более нескольких часов и помогает в значительной степени определиться с эмпирической антибиотикотерапией (то есть, лечением антибиотиками широкого спектра действия). Следует учесть, что даже среди антибактериальных препаратов есть те, которые рекомендованы в большей мере против грамположительных микроорганизмов (бета-лактамы – защищенные пенициллины, такие как амоксициллин, а также цефалоспорины первых двух поколений – цефазолин и зинацеф), а есть такие, которые будут в большей степени эффективны при патологии, вызванной грамотрицательной флорой – (цефтриаксон, цефоперазон, цефепим). Точное определение вида возбудителя и его чувствительности к определенным антибиотикам – занятие достаточно продолжительное, а потому его результаты будут актуальны только лишь в том случае, если назначенная в первый день заболевания антибактериальная терапия окажется неэффективной. Эта методика реализуется в крупных стационарах, где есть круглосуточная лаборатория.

Важным моментом в исследовании мокроты при пневмонии является, в большей мере, определение сопутствующих заболеваний. Главным образом – это присутствие микобактерии туберкулеза (палочки Коха) или же бронхиальной астмы (при этом заболевании также есть патогномоничные признаки в анализе мокроты). Обязательно оценивается цвет мокроты.

Проведение подготовки больного к сдаче мокроты

Забор мокроты в обязательном порядке должен проводиться еще до начала антибактериальной терапии, так как, в противном случае, велика вероятность ложноотрицательного результата.
Сдавать мокроту надо только утром, до приема пищи. Обязательно надо почистить зубы, для того, чтобы бактерии, входящие в состав зубного налета не попали в анализ.
На ночь больному принять муколитик (одну таблетку амброксола или лазолвана) и большое количество жидкости, для того, чтобы облегчить отхождение патологического секрета. Отходит мокрота лучше после приема щелочной минеральной воды.
Непосредственно сбор мокроты должен проводиться только после откашливания, следующего сразу же за максимально глубоким вдохом – только таким образом можно будет получить патологический секрет из максимально удаленных отделов респираторного тракта. Собирать мокроту необходимо только лишь в специальные пластиковые стерильные контейнеры (они продаются в аптеке, их цвет – белый или прозрачный). Собирать анализ от каждого больного необходимо в две емкости.
В максимально короткие сроки доставить материал в лабораторию. Если за время транспортировки изменился цвет мокроты – собранный материал подлежит утилизации

Плюсы и минусы метода

Исследование мокроты

Чаша Петри для исследования биоматериала.

Следует отметить, что даже при том условии, что мокрота будет собрана идеально правильно, велика вероятность ложноположительных или же ложноотрицательных результатов. Для повышения достоверности этого метода диагностики анализ берется в две емкости, однако, и это далеко не всегда гарантирует успех. Большое значение в проведении этого анализа имеет человеческий фактор. Кроме того, если материал в самые короткие сроки не был доставлен в лабораторию, вероятность получения достоверных результатов близка к нулю. Атипичные возбудители вообще невозможно высеять на питательную среду. Однако, вместе с тем, этот метод диагностики в разы дешевле, чем проведение полимеразной цепной реакции, так что не теряет своей актуальности и по сегодняшний день, несмотря на интенсивное развитие передовых технологий в лабораторной диагностике.

Этапы проведения

На данный момент общепринятым стандартом является исследование мокроты, предполагающее четыре этапа:

Визуальная оценка образца. Определяется цвет мокроты, мутность, консистенция, запах.
После этого проводится микроскопический анализ. На этом этапе определяется наличие микроорганизмов в анализе как таковых, кроме того – поддается ли их клеточная стенка окраске по Грамму (необходимо оценить цвет клеточной стенки высеянных бактерий).
После этого проводится микробиологический анализ – непосредственно высев патогенного микроорганизма на питательные среды с определением в дальнейшем чувствительности к антибиотикам.
И только после этих всех этапов, разрешается биохимический анализ. Проводится с целью определения наличия крови (сгустков, которые невозможно визуализировать), выявления уровня определенных биологически активных веществ, ферментов, белков и так далее.

Исследование мокроты

На рисунке: цифрой 1 и 2 обозначаются элементы, характерные для эозинофильных изменений в анализе мокроты. Пневмонию не исключает, но больше характерно для бронхиальной астмы.

Какие результаты анализа говорят о развитии воспаления легких?

Если у человека имеет место воспаление легких, то в анализе мокроты, скорее всего, будут отмечаться следующие изменения:

Количество отделяемой мокроты не превышает сто мл за день; в том же случае, если наблюдается увеличение количества отделяемого секрета, это будет свидетельствовать о наличии отрицательной динамики течения воспалительного процесса.
Возможно будет изменение цвета мокроты – желтый цвет укажет на эозинофильный характер воспалительного процесса, бурый цвет – на то, что имеет место крупозная пневмония или же на то, что воспаление легких вызвано вирусом гриппа. Изменение цвета – неблагоприятный прогностический признак.
Значение рН выше или же равняется семи (то есть щелочная или нейтральная реакция).
При микроскопическом исследовании, как правило, будут обнаружены наиболее распространенные возбудители воспаления легких – стафилококки, стрептококки, пневмококки, намного реже – гемофильная палочка и прочие микроорганизмы. Атипичную флору (хламидии, микоплазмы, легионеллы) высеять невозможно по определению, так как эти микроорганизмы проявляют себя исключительно в клетках организма-хозяина (то есть, они являются облигатными внутриклеточными паразитами). В том случае, если пневмония вызвана вирусами, установить это при посеве мокроты также не получится. Посев на определение вирусов – это очень сложный и дорогостоящий анализ, требующий использования оборудования и реактивов лаборантом только с очень высокой квалификацией, прошедшего курс специальной подготовки.
Очень важно определить в мокроте наличие или же отсутствие микобактерии туберкулеза и гемосидерина (продукта распада гемоглобина). Эти показатели в значительной мере изменят тактику ведения пациента. Обнаружение палочки Коха укажет на открытую форму туберкулеза у больного и укажет на необходимость его госпитализации в противотуберкулезный диспансер, наличие гемосидерина будет свидетельствовать о наличии крови в мокроте, что также является крайне неблагоприятным в прогностическом плане признаком. После определения любого из этих показателей тактика ведения больного должна быть пересмотрена в обязательном порядке.

Выводы

Анализ мокроты при пневмонии не может на сто процентов подтвердить диагноз или опровергнуть его, однако, благодаря этому исследованию можно провести дифференциальную диагностику или же внести корректировки в схемы лечения, тактику ведения больного. После получения его результатов в большинстве случаев никаких корректив в лист назначения не вносится, однако все-таки перестраховаться надо обязательно. Лучше убедиться в отсутствии сопутствующих заболеваний, чем после совершенной ошибки в диагностическом алгоритме лечить осложнения болезни.

Советуем почитать: Проведение анализа крови при пневмонии

Видео: Воспаление лёгких — Школа доктора Комаровскогом

Источник

Пневмония, бронхит или бронхиальная астма, сопровождающиеся длительным кашлем, могут стать поводом для проведения анализа мокроты.

Терапевт или пульмонолог, назначая исследование, надеется определить:

вид возбудителя заболевания;
чувствительность культуры к антибиотикам;
характер воспалительного процесса;
эффективность курса лечения.

Практический и научный аспект изучения проб

Результаты анализа будут важны в первую очередь для лечения конкретного пациента, поскольку позволят уточнить терапевтическую стратегию. Микробиологическое исследование позволит заменить препараты, назначенные эмпирическим способом, на конкретные формулы, действующие прицельно. В результате лечение станет менее затратным, но эффективным. Назначение препаратов узкого спектра действия вносит вклад в решение глобальной проблемы резистентности микроорганизмов к антибиотикам.

Кроме того, выявление особо вирулентных инфекций в мокроте пациента (C. burnetii, Coxiella psittaci, Legionella spp., вирус гриппа типа А) поможет снизить риски заражения окружающих и приступить к адекватному лечению своевременно.

В научном плане исследования мокроты представляют интерес для составления списка патогенов, способных вызывать пневмонию и другие заболевания органов дыхания, и выявить тенденции по изменению их чувствительности к антибиотикам.

Согласно российским рекомендациям по диагностике и лечению внебольничной пневмонии анализ секрета дыхательных путей проводят для установления этиологии заболевания. Решающими являются ответы бактериоскопии мазка мокроты, окрашенного по Граму, и культурального (бактериологического) исследования.

Для стационарных больных анализ является обязательным и по возможности собирается до лечения антибиотиками. Последующие заборы проб назначаются в зависимости от протекания заболевания.

При амбулаторном лечении пневмонии анализ мокроты, как правило, не назначают. Это связано с низкой вероятностью выявления бактерий S. pneumoniae после транспортировки проб и поздним получением результатов посевов. Легкие формы воспаления органов дыхания лечатся эмпирическим способом.

Исключение составляют амбулаторные пациенты:

не отвечающие на назначенную антибактериальную терапию;
с факторами риска туберкулеза, имеющие продуктивный кашель, ночные поты, потерю массы тела;
в условиях эпидемий.

Лабораторный анализ мокроты

Мокротой называют паталогический секрет дыхательных путей, который отходит с кашлем. Он образуется в результате повреждения слизистой оболочки легких, бронхов или трахеи физическим способом, химическими веществами или микроорганизмами.

В лаборатории полученные пробы проходят четырехуровневое исследование:

Макроскопическое, когда качества патологического секрета оцениваются визуально (без применения специального оборудования) с описанием количества, консистенции, характера, цвета, прозрачности, запаха, примесей и включений.
Микроскопическое, при котором определяют клеточный состав секрета и наличие микрофлоры в нативных и окрашенных мазках.
Микробиологическое – с проведением посевов для выявления патогена и определения его чувствительности к лекарственным препаратам.
Химическое исследование проводится с использованием реактивов и выявляет кислотность мокроты. Наличие в ней белков, крови, желчного пигмента и гемосидерина. Хотя этот вид экспертизы практикуется редко, но имеет значение для отличия начинающегося туберкулеза и крупозной пневмонии, прорыва абсцесса печени в легкие и другой патологии.

Какие результаты указывают на наличие болезни

Из макроскопических исследований мокроты на воспаление легких указывают:

небольшое количество отделяемого секрета (до 100 мл в сутки), где увеличение порции может служить признаком ухудшения состояния;
ржавый цвет при гриппозной, крупозной или очаговой пневмонии и ярко желтый – при эозинофильной. В первом случае окрашивание происходит продуктом распада крови;
мокрота без запахов;
характер патологического секрета с различным соотношением слизи и гноя в зависимости от возбудителя и локализации пневмонии (слизистая – при внебольничной пневмонии, слизисто-гнойная или гнойная – при стафилококковой пневмонии, гнойно-слизистая – при бронхопневмонии, очень редко с кровью);
включения в виде фиброзных свертков, желчных пигментов;
щелочная или нейтральная реакция проб.

Микроскопические исследования проводятся в несколько этапов. Исследуются нативные и окрашенные мазки (анализ по Граму). Крупные включения рассматривают при малом увеличении, на следующем этапе степень разрешения увеличивают. В пробах могут быть обнаружены следующие признаки пневмонии:

Спирали Куршмана (рис. 1) названы по имени немецкого врача (H. Curschmann, 1846-1910). В слизь попадают из мелких бронхов и бронхиол при сильных кашлевых толчках. Представляют собою закрученные нитевидные спирали, покрытые мантией из лейкоцитов, эозинофильных гранулоцитов и кристаллов Шарко-Лейдена. Формируются при бронхитах, бронхиальной астме и реже при пневмонии.

Спирали Куршмана.

Кристаллы Шарко-Лейдена (рис. 2) формируются при эозинофильной пневмонии из распадающихся эозинофильных гранулоцитов. Представляют собою восьмиугольники без цвета с заостренными концами. Состоят из белка, растворяются в горячей воде, щелочах и кислотах. Названы по именам: французского невропатолога Шарко (J.M. Charcot, 1825-1893) и немецкого невропатолога Лейдена (E.V. Leyden, 1832-1910).

Кристаллы Шарко-Лейдена.

Элементы крови. В мокроте при пневмонии может присутствовать небольшое количество лейкоцитов (нейтрофильных и эозинофильных гранулоцитов). Нейтрофильные гранулоциты (рис. 3) определяют характер мокроты, а однородные эозинофильные (рис. 4) придают ей желтоватый цвет. Большое количество нейтрофилов свидетельствует о воспалительном процессе инфекционного происхождения, а эозинофилов – о процессе паразитарной природы.

Нейтрофильные гранулоциты.

Однородные эозинофильные гранулоциты.

В мокроте при воспалении легких могут присутствовать эритроциты в неизмененном виде.

Если поражены нижние отделы легких, то в мокроте могут встречаться альвеолярные макрофаги (рис. 5). Круглые клетки размером до 25 мкм внутри могут содержать угольную пыль, табачный пигмент, гемосидерин или эритроциты.

Альвеолярные макрофаги.

В мокроте могут находиться эпителиальные клетки (рис. 6). Это возможно при загрязнении пробы слюной или выделениями из больных бронхов.

Эпителиальные клетки.

Иногда, в случаях абсцедирующей пневмонии в мокроте обнаруживают эластические волокна (рис. 7). Они выглядят как блестящие длинные волокна и свидетельствуют о разрушениях легочной паренхимы.

Эластические волокна.

Глистные инвазии как причина пневмонии могут быть выявлены при обнаружении яиц, личинок или взрослых особей: трофозоитов E. histolytica, Ascaris lumbricoides, E. granulosus и др.

Целью бактериологических исследований является выявление возбудителя пневмонии и определение списка антибиотиков, действующих на инфекцию. Чаще всего ими являются (в порядке убывания):

пневмококки (рис. 8);

Пневмококк.

бактерии Фридлендера (рис. 9);

Бактерии Фридлендера.

стрептококки (рис. 10);

Стрептококк.

стафилококки (рис. 11).

Стафилококк.

Как подготовиться к диагностике

На анализ пробы мокроты отбирают утром до приема пищи. На ночь пациенту назначают отхаркивающие препараты, обильное питье. Перед процедурой следует тщательно промыть рот и нос теплой водой, почистить зубы. Удаляется слюна и скопившаяся слизь.

После глубокого вдоха и откашливания отходит требуемый секрет. Его собирают в стерильную емкость и закрывают крышкой. Образцы следует немедленно доставить в лабораторию. Если такой возможности нет, то емкость можно поместить в холодильник на непродолжительное время.

Насколько точен анализ мокроты?

По сведениям коллег из Британского торакального общества (BTS), анализ мокроты достоверен только в 60% случаев. К его недостаткам относят:

низкую чувствительность после употребления антибиотиков;
короткий срок хранения проб;
малая вероятность получения качественных образцов мокроты;
зависимость от опыта лаборанта;
ограниченная доступность развернутого анализа.

Тем не менее анализ мокроты пока доступнее и дешевле, чем мультиплексная полимеразная цепная реакция (ПЦР), и относительно быстр.

Источник